伯乐bio-rad电穿孔仪MicroPulse的基本原理:MicroPulser电穿孔仪可以用于细菌、酵母和其他众多微生物的电击转化,转化时,高压电脉冲作用于悬浮在小体积高阻介质中的样品。本系统由一个脉冲发生器(pulsegenerator)模块、一个电击腔(shockingchamber)和一个装有电极的电击杯(cuvette)组成。样本放置于电击杯的电极之间。MicroPulser模块包含一个电容器,将电容器充电至高电压,然后模块将电容器中的电流放电到试管中的样品中。
伯乐bio-rad电穿孔仪的电容放电电路产生具有指数衰减波形的电脉冲。当电容器放电至样品时,跨越电极的电压迅速上升至最大电压(or峰值电压,peakvoltage;也称为初始电压,Vo),并随时间(t)减小。MicroPulser仪器的一些参数可以进行设置以达到最大转化效率,包括场强E,时间常数T,截断指数衰减脉冲的宽度。场强的设置可以有两种方式进行操作。一是,介于200-3000V电压可以直接在仪器上设置,这是最容易控制的。改变电压而保持其他条件不变是大多数电穿孔优化程序的基础。第二,使用不同电极间隙宽度的电转杯也是改变场强的一种方法。对于微生物的电穿孔,0.1和0.2cm间隙的电转杯最常被使用。E.coli的电穿
伯乐bio-rad电穿孔仪时间常数可以通过改变样品的电阻而改变。样品电阻的改变可以通过两种方式。一是,增加电穿孔介质的盐浓度或缓冲浓度会降低样品的电导,反之亦然,结果导致时间常数的改变。第二,电转杯中样品体积与样品电阻呈反比,降低样品体积会增加样品电导。样品体积对电导的影响在低电阻介质中是比较显著的。