分析荧光制冷CCD的相关知识
发布时间: 2016-10-25 点击次数: 2212次
分析荧光制冷CCD的相关知识
选择适当的荧光制冷CCD镜头,对于体内可见光成像是非常重要的。如何选择活体荧光的CCD呢?荧光制冷CCD有一些重要的参数:
1)荧光制冷CCD像素。CCD像素决定成像的图片质量,像素越高,成像质量越好。由于荧光背景光较强,产生非特异性杂光干扰明显,需要配有高分辨率CCD的相机。
2)前照式还是背照式CCD。一般而言,背照式CCD具有更高的量子效率,但是只有在检测极弱光信号优势明显(如活体生物发光成像),但在强光检测中与前照式CCD无本质差别,还更容易光饱和,并且其成本较高的弱势使其不属于荧光检测常规要素。
3)荧光制冷CCD温度。荧光制冷CCD分为两种:恒定低温制冷CCD和相对低温制冷CCD。恒定低温制冷CCD拥有稳定的背景,可以进行背景扣除;而相对低温制冷CCD由于背景不稳定,一般不能进行有效的背景扣除。CCD制冷温度越低,产生的暗电流越小,如图3所示,当制冷温度达到-29℃时,产生的暗电流已经低至0.03e/pixel/s。由于仪器自身产生的噪音主要由暗电流热噪音和CCD读取噪音组成,而目前CCD读取噪音zui低只能降至2erms;因而更低温度的CCD并不能明显的降低背景噪音,而成本却极大提高。
4)荧光制冷CCD读取噪音和暗电流。荧光制冷CCD读取噪音和暗电流热噪音是成像系统产生背景噪音的主要因素,但是在荧光成像中,zui主要的背景噪音却是来自于荧光背景光。荧光成像信噪比的改善主要依赖于荧光背景光的有效控制和背景扣除技术。